透過無外泌體胎牛血清與植物來源蛋白腖優化臍帶間質幹細胞（UC-MSCs）外泌體生產條件
🔬 研究作者：C. Lezin, B. Lorenzini, S. Soave, S. Goulinet, H. Logtari, AC. Ponsen, G. Uzan, P. Mauduit
🏛 研究機構：Inserm U1197, Paris-Saclay University, France
Abstract 摘要
間質幹細胞 (Mesenchymal Stromal Cells, MSCs) 於 1960 年代被發現，並在細胞治療領域引起廣泛關注。MSCs 能夠透過旁分泌 (paracrine signaling) 與接觸傳遞 (juxtracrine signaling) 與微環境進行通訊。許多研究顯示，其治療效果主要來自於分泌產物，其中尤以細胞外囊泡為關鍵。這項發現促使無細胞治療 (Acellular Therapy) 成為新興研究方向。
目前，MSC 衍生的 EVs 通常在化學定義培養基（CDM）或營養剝奪條件（starved condition）下生產。本研究目標為優化更適合臨床應用的 EVs 生產條件。我們採取雙管齊下的策略：
1️⃣ 培養基組成優化：使用切向流過濾技術（Tangential Flow Filtration, TFF）去除胎牛血清（FBS）中的 EVs，獲得無 EVs 胎牛血清（EVs-free FBS）。
2️⃣ 培養基塗層改進：透過植物來源蛋白腖（peptone）作為塗層，提高 MSCs 的 EVs 產量。
研究結果顯示，我們的自有方法可顯著提升 EVs 產量，並在兩種功能測試（遷移實驗與傷口癒合實驗）中展現更佳效果。我們的方法可能為EVs 大規模生產帶來突破，這是未來治療性 EVs 開發的關鍵步驟。
🔍 研究貢獻
✅ 無 EVs 胎牛血清（EVs-free FBS）+ 植物來源蛋白腖（Peptone）可顯著提升 EVs 產量
✅ 改良培養策略，提升 EVs 在傷口修復與細胞遷移中的功能表現
✅ 可擴增生產規模（upscaling production），適用於臨床治療性 EVs 開發
📎 原文
OPTIMIZATION OF UMBILICAL CORD MESENCHYMAL STROMAL CELL-DERIVED EVS PRODUCTION CONDITIONS USING EVS-FREE FETAL BOVINE SERUM AND VEGETAL PEPTONE
C.LEZIN, B.LORENZINI, S.SOAVE, S.GOULINET, H.LOGTARI, AC.PONSEN, G.UZAN, P.MAUDUIT
Inserm U1197, Paris-Saclay University, France
Mammalian cells are the natural source of many therapeutic proteins and are used as the most elaborated platform for the production of recombinant proteins with clinical applications.
For more than 15 years, Organotechnie’s Tryptone N1 has been widely documented to favor high titer protein expression post-transfection.
The HEK293 cells have been used to optimize IL-4 expression with various peptones: Vegetal Peptones versus Tryptone N1 as control.
The aim of the study is to show the efficiency of the plant origin peptones for the production of His-hIL4 construct from HEK293 cells.
The study shows that the Peptones from Pea, Guar and Soy Proteins enabled an improved protein production, around 150% more than our control, the Tryptone N1.
These Plant Peptones are: P112, G115 and S204.
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